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簡(jiǎn)要描述:Olink蛋白組 是一種超微量、高靈敏、高通量的靶向蛋白組技術(shù),核心是PEA(鄰近延伸分析):用一對(duì)帶 DNA 標(biāo)簽的抗體識(shí)別同一蛋白,把 “蛋白濃度" 轉(zhuǎn)成 “DNA 濃度",再用 qPCR/NGS 定量,特別適合血液 / 體液樣本的大隊(duì)列 biomarker 研究。
更新時(shí)間:2026-05-22 12:04:30
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一、核心原理:PEA 技術(shù)(一句話講透)
1. 抗體對(duì) + DNA 標(biāo)簽:每個(gè)目標(biāo)蛋白對(duì)應(yīng)一對(duì)抗體,分別偶聯(lián)互補(bǔ)的單鏈 DNA(各帶蛋白特異條形碼)。
2. 雙識(shí)別 + 鄰位雜交:只有兩個(gè)抗體同時(shí)結(jié)合同一蛋白,兩條 DNA 才會(huì)靠近、雜交成雙鏈。
3. 延伸 + 擴(kuò)增 + 定量:DNA 聚合酶延伸→PCR 擴(kuò)增→qPCR/NGS 讀數(shù);信號(hào)強(qiáng)度 = 蛋白濃度。
4. 關(guān)鍵優(yōu)勢(shì):非特異性結(jié)合不會(huì)讓 DNA 靠近,幾乎無背景,特異性可達(dá) 99.7%。
· 超微量:1–6 μL血清 / 血漿即可(比傳統(tǒng) ELISA 少 100 倍)
· 超高靈敏:檢測(cè)下限 fg/mL 級(jí),能抓到極低豐度的細(xì)胞因子、信號(hào)蛋白
· 超寬動(dòng)態(tài):10 個(gè)數(shù)量級(jí),同時(shí)覆蓋高豐度(白蛋白)與低豐度(炎癥因子)
· 高通量:一次可測(cè) 96–384 樣本;蛋白數(shù):Target(48/96)、Explore(384)、Reveal(~1000)。
· 高重現(xiàn):CV <10%(板內(nèi))、<20%(板間),適合大隊(duì)列(上萬例)。
· 樣本類型:血清、血漿、腦脊液、尿液、細(xì)胞上清、組織裂解液。
1. 樣本準(zhǔn)備:血清 / 血漿,1 μL 足夠。
2. PEA 反應(yīng):加抗體對(duì)→孵育結(jié)合→DNA 雜交延伸。
3. PCR 擴(kuò)增:生成帶條形碼的擴(kuò)增子。
4. NGS/qPCR 檢測(cè):測(cè)序或熒光定量,得到每個(gè)蛋白的讀數(shù)。
5. 數(shù)據(jù)分析:標(biāo)準(zhǔn)化→差異蛋白→通路富集→ biomarker 篩選。
1. 疾病 Biomarker 篩選:腫瘤早篩、自身免疫病、神經(jīng)退行性疾?。ㄈ绨柎暮D。?、心血管病;AUC 可達(dá) 0.9+。
2. 大隊(duì)列流行病學(xué):UK Biobank、中國(guó)慢性病隊(duì)列,上萬樣本的蛋白組掃描
3. 藥物研發(fā):靶點(diǎn)驗(yàn)證、藥效監(jiān)測(cè)、耐藥機(jī)制、pQTL 研究(蛋白數(shù)量性狀位點(diǎn))
4. 多組學(xué)整合:Olink(蛋白)+ 基因組 + 轉(zhuǎn)錄組 + 代謝組,構(gòu)建疾病分子網(wǎng)絡(luò)。
5. 免疫與炎癥研究:細(xì)胞因子、趨化因子、免疫檢查點(diǎn)蛋白的原位 / 循環(huán)水平分析
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